При диагностике столбняка и газовой раневой инфекции исследуемыми материалами являются экссудат, кровь, кусочек поврежденной ткани, извлеченные из раны инородные тела, перевязочный материал; при диагностике ботулизма – рвотные массы, кровь, промывные воды желудка, остатки пищи.

1. Материал засевается на среду Китт – Тароцци, затем:
а) сразу же прогревается на водяной бане при 80 градусах в течение 20 минут (для уничтожения факультативных анаэробов);
б) после прогревания посевы помещают в термостат на 24 часа при 37 градусах ( для прорастания спор и накопления массы микробных клеток).
2.Посевы извлекают из термостата и подвергают исследованию:
а) макроскопически определяют наличие микробных клеток (по помутнению питательной среды); б) проводят микроскопическое исследование (в приготовленном микропрепарате, окрашенном по Грамму, отмечается наличие грамположительных палочковидных бактерий).
3.Производят отсев со среды Китт – Тароцци для получения изолированных колоний по методу Цейслера или Вейнберга.

Выделение спорообразующих анаэробов по методу Цейслера:
а) пересев петлей из пробирки со средой Китт – Тароцци последовательно в три чашки Петри с кровяным сахарным агаром (агар Цейслера);
б) чашки помещают в анаэростат, закрывают плотно крышкой и откачивают воздух;
в) анаэростат ставится в термостат на 24 часа при 37 градусах;
Через 24 часа анаэростат извлекают из термостата, из него достают чашки с посевом и проводится:
а) макроскопическое исследование выросших колоний;
б) микроскопическое исследование выросших колоний;
в) отсев исследуемой колонии в пробирку со средой Китт – Тароцци для получения чистой культур и накопления массы микробных клеток;
г) посев ставится в термостат на 24 часа при 37 градусах.
Через 24 часа посевы извлекаются из термостата и проводится:
а) макроскопическое исследование;
б) микроскопическое исследование;
в) проверка на токсигенность;
г) изучение антигенной структуры;
д) изучение биохимической активности;
е) определение чувствительности к антибиотикам.

Выделение спорообразующих анаэробов по методу Вейнберга:
а) берется ряд пробирок (5 – 6 шт.), содержащих по 0,5 мл МПБ, и в первую пробирку петлей со среды Китт – Тароцци вносится небольшое количество материала;
б) методом переката (из первой пробирки во вторую, из второй в третью и т.д.) готовится разведение микробных клеток;
в) в эти пробирки добавляется по 4 мл расплавленного и охлажденного до 42 градусов сахарного мясопептонного агара. Смесь тщательно и быстро перемешивается;
г) из каждой пробирки смесь набирается в пипетку, пипетка в горизонтальном положении помещается в термостат на 24 часа при 37 градусах.
Через 24 часа пипетки извлекаются из термостата и проводится исследование посевов:
а) макроскопическое исследование выросших колоний;
б) в месте нахождения подозрительной колонии пипетка разламывается и колония петлей стерильно переносится в пробирку со средой Китт – Тароцци для получения чистой культуры и накопления микробной массы;
в) пробирки с посевами помещают в термостат на 24 часа при 37 градусах.
Через 24 часа пробирки извлекаются из термостата и посевы подвергаются исследованию:
а) макро- и микроскопическое исследование выросшей культуры;
б) проверка на токсигенность;
в) изучение антигенной структуры;
г) изучение биохимической активности;
д) проверка на чувствительность к антибиотикам.

В начало страницы